| 微生物限度檢查儀檢查驗證影響因素解析 |
| 點擊次數：2362 更新時間：2019-06-18 |
| 微生物限度檢查儀檢查驗證影響因素解析 微生物限度檢查儀符合GB/T飲用天然礦泉水檢驗方法關于細菌檢測實驗標準,符合藥典微生物限度檢查標準。該儀器由滅菌排液一體化過濾箱體、連接膠管、火焰滅菌器、不銹鋼過濾杯共同組成，可同時對多個樣品進行檢測，可供制藥純化水、注射用水及液體制劑的微生物檢查；食品飲料、礦泉水、純凈水的菌落總數檢查；疾控等水質的細菌總數檢查，致病菌檢測；化工各種需測試微生物的水樣檢測；環境監測站及污水處理廠水中的固體懸浮物進行測定等。 在建立供試品的微生物限度檢查法或檢查法的檢驗條件發生改變可能影響檢驗結果時，應對檢查法的可靠性進行方法驗證，在其供試品3次獨立的平行試驗中，細菌、霉菌及酵母菌的回收率均應達70%以上，控制菌檢查方法驗證的試驗組應檢出試驗菌，陰性菌對照組不得檢出，否則不符合驗證試驗要求，應建立新方法并重新驗證。但方法驗證周期長，程序繁瑣，干擾因素多，若控制不當則難以達到標準要求。 驗證過程中易影響結果的幾個原因： 1.藥品的抑菌或殺菌性成分 對于供試藥品的抑菌性，國外藥典規定在檢查前先通過試驗加以確定，并對供試品進行處理，消除抑菌作用影響后再進行檢查。在我國藥典中，供試藥品的抑菌性是根據不同稀釋度的菌數變化和控制菌的陽性對照試驗是否正常生長來判斷的。在試驗中，低稀釋級抑制菌不生長或少生長而高稀釋級才生長的情況并不少見，這給方法驗證帶來了難度。 2.標準菌株的保存及菌液的制備、貯期 藥品微生物限度檢查對象具有以下特征：屬能繁殖的活細胞生物，活性易變性；數量少且分布不均勻；多數處于受損狀態；生存環境具多樣性及復雜性。驗證試驗中使用的標準菌株形態變異、菌落變異、耐藥性變異等均可使細菌叢集或分散不均，從而造成計數誤差大，影響驗證結果。 3.操作環境不符規定 按微生物限度檢查要求，無菌室應由無菌操作間和兩個緩沖間組成，操作間與緩沖間之間應有樣品傳遞箱，操作間和緩沖間的門不應直對，每個無菌室應有獨立的空氣凈化系統；環境潔凈度不應低于10000級，其操作點或凈化工作臺的凈化級別應達到100級。應加強無菌室的清潔、維護和保養工作，定期檢測元菌操作臺及凈化工作臺的潔凈度，對不合格者應及時處理。 4.操作誤差 操作不熟練，實驗環節控制不嚴格，或實驗操作不夠嚴謹，均會給試驗結果帶來很大影響。因此，在操作中，所取制備菌液的單位體積菌數比標準規定的要稍高些，以減少加在樣品中的菌液體積。 5.培養基靈敏度下降 為了方便，很多單位在試驗中都使用干粉培養基，但干粉培養基極易吸潮，存放不當會出現凝塊，使凝固性變差，所以，要注意干粉培養基的貯存和保管。用電爐直火加熱熔化培養基或將剩余的培養基冷藏后再熔化使用，均很容易破壞培養基中的營養成分，并直接影響菌回收率。 |
